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タイトルMolecular mechanism for Tn7-like transposon recruitment by a type I-B CRISPR effector.
ジャーナル・号・ページCell, Vol. 186, Issue 19, Page 4204-4215.e19, Year 2023
掲載日2023年9月14日
著者Shukun Wang / Clinton Gabel / Romana Siddique / Thomas Klose / Leifu Chang /
PubMed 要旨Tn7-like transposons have co-opted CRISPR-Cas systems to facilitate the movement of their own DNA. These CRISPR-associated transposons (CASTs) are promising tools for programmable gene knockin. A key ...Tn7-like transposons have co-opted CRISPR-Cas systems to facilitate the movement of their own DNA. These CRISPR-associated transposons (CASTs) are promising tools for programmable gene knockin. A key feature of CASTs is their ability to recruit Tn7-like transposons to nuclease-deficient CRISPR effectors. However, how Tn7-like transposons are recruited by diverse CRISPR effectors remains poorly understood. Here, we present the cryo-EM structure of a recruitment complex comprising the Cascade complex, TniQ, TnsC, and the target DNA in the type I-B CAST from Peltigera membranacea cyanobiont 210A. Target DNA recognition by Cascade induces conformational changes in Cas6 and primes TniQ recruitment through its C-terminal domain. The N-terminal domain of TniQ is bound to the seam region of the TnsC spiral heptamer. Our findings provide insights into the diverse mechanisms for the recruitment of Tn7-like transposons to CRISPR effectors and will aid in the development of CASTs as gene knockin tools.
リンクCell / PubMed:37557170 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.83 - 3.65 Å
構造データ

EMDB-28980, PDB-8fcj:
Cryo-EM structure of Cascade-DNA (P23) complex in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.83 Å

EMDB-28993, PDB-8fcu:
Cryo-EM structure of Cascade-DNA-TniQ-TnsC complex in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.19 Å

EMDB-28994, PDB-8fcv:
Cryo-EM structure of TnsC-TniQ-DNA complex in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.95 Å

EMDB-28997, PDB-8fcw:
Cryo-EM structure of TnsC-DNA complex in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.87 Å

EMDB-28998, PDB-8fcx:
Cryo-EM structure of TnsC oligomer in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.04 Å

EMDB-29000, PDB-8fd2:
Cryo-EM structure of Cascade complex in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.65 Å

EMDB-29001, PDB-8fd3:
Cryo-EM structure of Cascade-PAM complex in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.12 Å

EMDB-29039, PDB-8ff4:
Cryo-EM structure of Cascade-DNA-TniQ-TnsC complex (composite) in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.6 Å

EMDB-29040, PDB-8ff5:
Cryo-EM structure of Cascade-DNA-fullRloop in type I-B CAST system
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.13 Å

化合物

ChemComp-ATP:
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP / ATP, エネルギー貯蔵分子*YM / アデノシン三リン酸

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

由来
  • peltigera membranacea (ウスバイヌツメゴケ)
  • nostoc sp. 'peltigera membranacea cyanobiont' 210a (バクテリア)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードDNA BINDING PROTEIN (DNA結合タンパク質) / CRISPR (CRISPR) / DNA recognition (DNA型鑑定) / TnsC / TniQ / Transposon (トランスポゾン) / DNA (デオキシリボ核酸) / CAST / Cascade / I-B

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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