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タイトルStructures illustrate step-by-step mitochondrial transcription initiation.
ジャーナル・号・ページNature, Vol. 622, Issue 7984, Page 872-879, Year 2023
掲載日2023年10月11日
著者Quinten Goovaerts / Jiayu Shen / Brent De Wijngaert / Urmimala Basu / Smita S Patel / Kalyan Das /
PubMed 要旨Transcription initiation is a key regulatory step in gene expression during which RNA polymerase (RNAP) initiates RNA synthesis de novo, and the synthesized RNA at a specific length triggers the ...Transcription initiation is a key regulatory step in gene expression during which RNA polymerase (RNAP) initiates RNA synthesis de novo, and the synthesized RNA at a specific length triggers the transition to the elongation phase. Mitochondria recruit a single-subunit RNAP and one or two auxiliary factors to initiate transcription. Previous studies have revealed the molecular architectures of yeast and human mitochondrial RNAP initiation complexes (ICs). Here we provide a comprehensive, stepwise mechanism of transcription initiation by solving high-resolution cryogenic electron microscopy (cryo-EM) structures of yeast mitochondrial RNAP and the transcription factor Mtf1 catalysing two- to eight-nucleotide RNA synthesis at single-nucleotide addition steps. The growing RNA-DNA is accommodated in the polymerase cleft by template scrunching and non-template reorganization, creating stressed intermediates. During early initiation, non-template strand scrunching and unscrunching destabilize the short two- and three-nucleotide RNAs, triggering abortive synthesis. Subsequently, the non-template reorganizes into a base-stacked staircase-like structure supporting processive five- to eight-nucleotide RNA synthesis. The expanded non-template staircase and highly scrunched template in IC8 destabilize the promoter interactions with Mtf1 to facilitate initiation bubble collapse and promoter escape for the transition from initiation to the elongation complex (EC). The series of transcription initiation steps, each guided by the interplay of multiple structural components, reveal a finely tuned mechanism for potential regulatory control.
リンクNature / PubMed:37821701 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.39 - 3.75 Å
構造データ

EMDB-15556, PDB-8ap1:
Cryo-EM structure of yeast mitochondrial RNA polymerase transcription initiation complex with two GTP molecules poised for de novo initiation (IC2)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.47 Å

EMDB-15662, PDB-8att:
Cryo-EM structure of yeast mitochondrial RNA polymerase transcription initiation complex with 4-mer RNA, pppGpGpUpA (IC4)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.44 Å

EMDB-15664, PDB-8atv:
Cryo-EM structure of yeast mitochondrial RNA polymerase transcription initiation complex with 5-mer RNA, pppGpGpApApA (IC5)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.39 Å

EMDB-15665, PDB-8atw:
Cryo-EM structure of yeast mitochondrial RNA polymerase transcription initiation complex with 6-mer RNA, pppGpGpApApApU (IC6)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.62 Å

EMDB-16442, PDB-8c5s:
Cryo-EM structure of yeast mitochondrial RNA polymerase transcription initiation complex with 7-mer RNA, pppGpGpUpApApApU (IC7)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.75 Å

EMDB-16443, PDB-8c5u:
Cryo-EM structure of yeast mitochondrial RNA polymerase transcription initiation complex with 8-mer RNA, pppGpGpUpApApApUpG (IC8)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.62 Å

EMDB-18183, PDB-8q63:
Cryo-EM structure of IC8', a second state of yeast mitochondrial RNA polymerase transcription initiation complex with 8-mer RNA, pppGpGpUpApApApUpG
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.68 Å

化合物

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-GTP:
GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / GTP / GTP, エネルギー貯蔵分子*YM / グアノシン三リン酸

由来
  • saccharomyces cerevisiae s288c (パン酵母)
キーワードTRANSCRIPTION (転写 (生物学)) / gene transcription (転写 (生物学)) / polymerase (ポリメラーゼ) / RDRP (RNA依存性RNAポリメラーゼ) / MTF1 / RPO41 / POLRMT / mtRNAP / DNA (デオキシリボ核酸) / transcription initiation (転写 (生物学)) / RNA polymerase (RNAポリメラーゼ) / mitochondria (ミトコンドリア) / IC7 / IC8 / IC8'

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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