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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5126 | |||||||||
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タイトル | In vivo 70S E.coli ribosome with PSRP1 | |||||||||
マップデータ | 70S E.coli ribosome and PSRP1 in vivo | |||||||||
試料 |
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キーワード | 70S / E.coli Ribosome / Cryo-EM PSRP1 / PSRP-1 / ribosomal protein / stress response factor. | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / Spinacia oleracea (ホウレンソウ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 14.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Sharma MR / Donhofer A / Barat C / Datta P / Fucini P / Wilson DN / Agrawal RK | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2010 タイトル: PSRP1 is not a ribosomal protein, but a ribosome-binding factor that is recycled by the ribosome-recycling factor (RRF) and elongation factor G (EF-G). 著者: Manjuli R Sharma / Alexandra Dönhöfer / Chandana Barat / Viter Marquez / Partha P Datta / Paola Fucini / Daniel N Wilson / Rajendra K Agrawal / 要旨: Plastid-specific ribosomal proteins (PSRPs) have been proposed to play roles in the light-dependent regulation of chloroplast translation. Here we demonstrate that PSRP1 is not a bona fide ribosomal ...Plastid-specific ribosomal proteins (PSRPs) have been proposed to play roles in the light-dependent regulation of chloroplast translation. Here we demonstrate that PSRP1 is not a bona fide ribosomal protein, but rather a functional homologue of the Escherichia coli cold-shock protein pY. Three-dimensional Cryo-electron microscopic (Cryo-EM) reconstructions reveal that, like pY, PSRP1 binds within the intersubunit space of the 70S ribosome, at a site overlapping the positions of mRNA and A- and P-site tRNAs. PSRP1 induces conformational changes within ribosomal components that comprise several intersubunit bridges, including bridge B2a, thereby stabilizes the ribosome against dissociation. We find that the presence of PSRP1/pY lowers the binding of tRNA to the ribosome. Furthermore, similarly to tRNAs, PSRP1/pY is recycled from the ribosome by the concerted action of the ribosome-recycling factor (RRF) and elongation factor G (EF-G). These results suggest a novel function for EF-G and RRF in the post-stress return of PSRP1/pY-inactivated ribosomes to the actively translating pool. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5126.map.gz | 7.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5126-v30.xml emd-5126.xml | 10 KB 10 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5126_1.png | 216.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5126 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5126 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5126.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 70S E.coli ribosome and PSRP1 in vivo | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.76 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : In vivo 70S E.coli ribosome with PSRP1
全体 | 名称: In vivo 70S E.coli ribosome with PSRP1 |
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要素 |
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-超分子 #1000: In vivo 70S E.coli ribosome with PSRP1
超分子 | 名称: In vivo 70S E.coli ribosome with PSRP1 / タイプ: sample / ID: 1000 / Number unique components: 2 |
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分子量 | 実験値: 2.8 MDa / 理論値: 2.8 MDa |
-超分子 #1: 70S Ribosome
超分子 | 名称: 70S Ribosome / タイプ: complex / ID: 1 / 組換発現: No / データベース: NCBI / Ribosome-details: ribosome-prokaryote: LSU 50S, SSU 30S |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 実験値: 2.5 MDa / 理論値: 2.5 MDa |
-分子 #1: plastid specific ribosomal protein-1
分子 | 名称: plastid specific ribosomal protein-1 / タイプ: ligand / ID: 1 / Name.synonym: PSRP1 / 組換発現: No / データベース: NCBI |
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由来(天然) | 生物種: Spinacia oleracea (ホウレンソウ) / 別称: Spinach / Organelle: chloroplast |
分子量 | 実験値: 270 KDa / 理論値: 270 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.6 詳細: 20mM Hepes-KOH, 8.2mM MgCl2, 80mM NH4Cl, 4mM beta-mercaptoethanol |
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グリッド | 詳細: 300 mesh coper grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 詳細: Vitrification instrument: Plunger / 手法: Blot for 3 seconds then plunge |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI F20 |
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電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 50760 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 4.3 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.6 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 14 µm / 実像数: 37 / 平均電子線量: 24 e/Å2 / ビット/ピクセル: 12 |
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Each Micrograph |
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最終 2次元分類 | クラス数: 15 |
最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 14.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: Spider / 使用した粒子像数: 18317 |